O Rock Band permite que até quatro jogadores simulem o desempenho de músicas populares de rock, tocando com controladores modelados por instrumentos musicais. Os jogadores podem tocar guitarra, baixo e bateria em músicas com "controladores de instrumentos", além de cantar através de um microfone USB.

Os jogadores são pontuados por sua capacidade de combinar as "notas" musicais de rolagem durante a execução de instrumentos, ou por sua capacidade de corresponder ao tom do vocalista nos vocais.